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Aus dem Diagramm unten können wir sehen, dass, wenn der RSI die 50 horizontale Linie von oben kreuzt, es eine Bestätigung eines Verkaufssignals zeigt und wenn der RSI die 50 horizontale Linie von unten kreuzt, zeigt es eine Bestätigung eines Kaufsignals an. Die 70 und 30 horizontalen Zeilen zeigen, dass die überkauften und überverkauften Gebiete nicht immer handeln, wenn der Markt diese Region betritt. Diese Anzeige wirkt wie ein gleitender Durchschnitt.

Die Grafik unten zeigt uns ein klares Bild von dem, was Im sagen. Wenn es eine Überkreuzung über der 80 horizontalen Linie gibt, zeigt es ein Verkaufssignal und wenn die Überkreuzung unterhalb der 20 Linie erscheint, zeigt uns ein KaufsignalTrading Without Noise Die Trending-Zeiten sind dann definiert, wenn die Nachfrage das Angebot übersteigt Aufwärtstrend oder das Angebot den Bedarf übersteigt Abwärtstrend.

Das Finden von Trends wird so einfach wie das Suchen nach dicken oder dünnen Linien. Diese Diagramme sind auch hervorragend für die Rauschunterdrückung, aber sie sind begrenzt, weil sie nicht bestimmen können, Trend Stärke anders als durch Messung der Bewegung Längen, die irreführend sein können.

Ermittlung der Trendstärke Die Trendstärke wird am besten durch den Einsatz von Indikatoren gemessen. Dieses Kennzeichen gliedert sich in zwei Teile: DI und - DI.

Diese beiden Indikatoren werden dann aufgetragen, um die Gesamt-Trendstärke zu bestimmen. Hier sehen Sie ein Beispiel, wie dies nützlich sein kann: Wie Sie sehen können, steigt die Steigung mit einer höheren Rate, wenn der Trend stärker und mit einer geringeren Rate ist, wenn der Trend ist Schwächer. Wenn es über 40 steigt, bedeutet das, dass der Trend wahrscheinlich zu Ende geht.

Wie Sie aus Abbildung 5 sehen können, kann es Ihnen eine ziemlich genaue Lektüre geben. Eine benutzerfreundliche Strategie erstellen Obwohl der ADX für sich alleine gut zu funktionieren scheint, kann die Marktvolatilität Zweitraten und falsche Signale verursachen.

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For the first step process may be used, by which the nucleic acids can be enriched. Oft sind die zu analysierenden Nucleinsäuren innerhalb der in Frage kommenden Fluidprobe nicht in der Lösung frei, sondern sind innerhalb von geschlossenen Strukturen, wie zum Beispiel Zellen oder Viren, lokalisiert.

Often the analyte nucleic acids are within the fluid sample in question is not in the solution free but are within closed structures, such as cells or viruses localized. In diagnostischen Tests ist es oft das Ziel, insbesondere pathogene Zellen oder Viren in Fluidproben, wie klinische Proben, zu identifizieren. In diagnostic tests, it is often the target, in particular pathogenic cells or viruses in the fluid sample, how to identify clinical samples. Solche Pathogene können z. Such pathogens such can.

The method according to the invention is suitable for extracting nucleic acids from the above as well as other organisms. Darum ist ein bevorzugter Aspekt der Erfindung das vorstehend beschriebene Verfahren, wobei Schritt a. Therefore, a preferred aspect of the invention is the method described above, wherein step a.

Zur Freisetzung des Inhalts von Zellen oder Viruspartikeln können sie mit Enzymen oder mit Chemikalien zur Auflösung, zum Abbau oder zur Denaturierung der Zellwände oder der Viruspartikel behandelt werden. To release the contents of cells or viral particles can be treated with enzymes or with chemicals to dissolve, to reduce or denature the cell walls or viral particles. Dieses Verfahren wird im Allgemeinen als Lyse bezeichnet. This process is commonly referred to as lysis.

Die resultierende Lösung, die solches lysiertes Material enthält, wird als Lysat bezeichnet. The resulting solution containing such lysed material is referred to as lysate. Daher umfasst das vorstehend beschriebene Verfahren in einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung weiterhin in Schritt a. Therefore, the method described above comprises, in a preferred embodiment of the invention continues in step a. Since the method is particularly advantageous according to the invention relating to high throughput efficiency and parallelization, a preferred aspect of the invention in the method described above, wherein the lysis buffer for the members of the plurality of different types of fluid samples is identical.

Auf diesem Weg wird die Komplexität der Probenpräparationsverfahrens weiter vermindert, da keine verschiedenen Lysereagenzien einzeln für die verschiedenen zu behandelnden Proben bereitgestellt werden müssen. In this way, the complexity of the sample preparation procedure is further reduced as no different lysis reagents must be provided separately for the different samples to be treated. Weiterhin kann das Verfahren leichter kontrolliert werden, wenn mit einem einzigen Lysepuffer gearbeitet wird.

Furthermore, the method can be controlled more easily when working with a single lysis buffer. Der Lysepuffer kann z. The lysis buffer can for. In einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung umfasst der Lysepuffer in dem vorstehend beschriebenen Verfahren eine oder mehrere, aus der folgenden Gruppe ausgewählte Komponenten: In a preferred embodiment of the invention, the lysis buffer in the above method comprises one or more components selected from the following group: Chaotrope Mittel, die im Allgemeinen die geordnete Struktur von Wassermolekülen in Lösung und nicht-kovalente Bindungskräfte in und zwischen den Molekülen stören, können an dem Verfahren der Probenpräparation mehrfachen Anteil nehmen.

Chaotropic agents which disturb the ordered structure in general of water molecules in solution and non-covalent binding forces in and between the molecules can take multiple shares of the methods of sample preparation. Insbesondere, jedoch nicht nur, können sie durch Beeinträchtigen der Nuclease-Tertiärstruktur als RNase-Inhibitoren eingesetzt werden. In particular, but not only, they can be used by interfering with the nuclease tertiary structure as RNase inhibitors.

As a rule, no further RNase inhibitor must be applied to the lysis buffer. Besides wearing chaotropic agents role in biological membranes such as plasma membranes or the membranes of cell organelles, if any, to catch up. Auch können sie beim adhäsiven Binden von Nucleinsäuren an Oberflächen wie Glas eine signifikante Rolle spielen siehe infra.

They can also play a significant role see infra in the adhesive binding of nucleic acids to surfaces such as glass. Bevorzugte chaotrope Mittel im Zusammenhang mit der Erfindung sind Guanidiniumsalze, wie Guanidiniumthiocyanat oder Guanidinhydrochlorid oder Guanidiniumchlorid oder Guanidiniumisothiocyanat, Harnstoff, Perchlorat, wie z. Preferred chaotropic agents in connection with the invention are guanidinium salts such as guanidinium thiocyanate or guanidine hydrochloride or guanidinium chloride or guanidinium isothiocyanate, urea, perchlorate such.

Kaliumperchlorat, weitere Thiocyanate oder Kaliumiodid. As potassium perchlorate, other thiocyanates or potassium iodide. Besonders bevorzugt ist Guanidiniumthiocyanat. Particularly preferred is guanidine thiocyanate. Allerdings können im Umfang der Erfindung auch andere chaotrope Mittel verwendet werden. However, the scope of the invention, other chaotropic agents can be used.

Buffer substances are generally used for maintaining a given pH or a certain pH range in a solution of significance. Dies ist die Voraussetzung für die meisten biologischen Systeme und meistens auch für In-vitro-Reaktionen erwünscht. This is a prerequisite for most biological systems and in most cases also for in vitro reactions desired.

Es kann auch für das Verfahren der Erfindung von Vorteil sein. It may also be the method of the invention is advantageous. Preferred buffers in the context of the invention are citrate buffer, such as sodium citrate as well as Tris Tris hydroxymethyl aminomethane buffer such as Tris-HCl, phosphate, N- 2-hydroxyethyl piperazine-N '- 2- ethanesulfonic acid HEPES , acetate buffer, but other buffers may be used in connection with the invention.

Die Verwendung von Alkohol in einem Lysepuffer zur Nucleinsäurepräparation kann ebenfalls von Vorteil sein, wie es dem Fachmann bekannt ist. The use of alcohol in a lysis buffer for nucleic acid preparation can also be advantageous, as it is known in the art. Besonders bevorzugt im Zusammenhang mit der Erfindung ist die Verwendung von Polidocanol, während im Lysepuffer, vorstehend beschrieben, auch ein anderer Alkohol verwendet werden kann.

Especially preferred within the context of the invention is the use of polidocanol, while, in the lysis buffer described above, and other alcohols may be used. Die Verwendung von Polidocanol zur Präparation von Nucleinsäuren wurde z.

The use of polidocanol for the preparation of nucleic acids such was. Reduktionsmittel können ebenfalls zur Denaturierung von unerwünschten Komponenten, wie RNase A, vorstehend erwähnt, beitragen. Reducing agents may also for denaturation of undesirable components, such as RNase A, mentioned above, to contribute. Insbesondere spalten Reduktionsmittel, wie sie auf dem Fachgebiet weithin bekannt sind, inter- und intramolekulare Disulfidbindungen, die besonders für die Tertiärstruktur von vielen Proteinen von Bedeutung sind.

In particular split reducing agent, such as are well known in the art, inter- and intramolecular disulfide bonds, which are particularly for the tertiary structure of many proteins is important. Preferred in the context of the invention, reducing agents are, such as dithiothreitol DTT , but others known in the art, reducing agents such. Im Hinblick auf das zuvor Genannte ist ein bevorzugter Aspekt der Erfindung das vorstehend beschriebene Verfahren, wobei der Lysepuffer die folgenden Komponenten umfasst: In view of the above, is a preferred aspect of the invention, the method described above, wherein the lysis buffer comprises the following components: In einer stärker bevorzugten Ausführungsform der Erfindung sind die Konzentrationen der vorstehend erwähnten Komponenten des Lysepuffers wie folgt: In a more preferred embodiment of the invention, the concentrations of the above-mentioned components of the lysis buffer are as follows: The pH of the lysis buffer described above is not limited to specific pH values.

Allerdings hat der Lysepuffer in einer bevorzugten Ausführungsform einen sauren pH-Wert, stärker bevorzugt einen pH-Wert zwischen 5,5 und 6,5, am stärksten bevorzugt etwa 5,8. However, the lysis buffer in a preferred embodiment has an acidic pH, more preferably a pH between 5. Ein während der Lyse oft angetroffenes Problem besteht darin, dass andere Enzyme, die die Komponente von Interesse abbauen, z.

One often encountered during the lysis problem is that other enzymes that break down the component of interest, eg. Desoxyribonucleasen oder Ribonucleasen, die Nucleinsäuren abbauen, wie RNase, vorstehend erwähnt, während des Lysevorgangs mit der Komponente von Interesse in Kontakt geraten.

These degrading enzymes may also be present outside the cells or may have been spatially separated in different cellular compartments before the lysis. Wenn die Lyse stattfindet, wird die Komponente von Interesse gegenüber den abbauenden Enzymen exponiert.

If lysis occurs, the component of interest with respect to the degrading enzymes is exposed. Weitere Komponenten, die während dieses Verfahrens freigesetzt werden, können z. Other components released during this process can be,. Endotoxine sein, die der Familie der Lipopolysaccharide angehören, die für Zellen toxisch sind, und können Probleme für Produkte hervorrufen, die zur Verwendung in der Human- oder Tiertherapie beabsichtigt sind.

Es gibt eine Vielzahl von Mitteln, um das oben genannte Problem zu beheben. There are a variety of means to resolve the above problem. Es ist üblich, chaotrope Mittel wie vorstehend beschrieben oder anionische, kationische, zwitterionische oder nicht-ionische Detergentien, wenn es beabsichtigt ist, Nucleinsäuren freizusetzen, zu verwenden. It is common to chaotropic agents as described above , or anionic, cationic, zwitterionic or non-ionic detergents when it is intended to release nucleic acids to use.

Es ist auch ein Vorteil, Proteasen zu verwenden, die schnell die zuvor beschriebenen Enzymen oder unerwünschte Proteine abbauen. It is also an advantage to use proteases which rapidly degrade the previously described enzymes or unwanted proteins.

However, this may cause other problems because the substances or enzymes can interfere with reagents or components in subsequent steps. Enzyme, die bevorzugt bei solchen Lyse- oder Probenpräparationsverfahren verwendet werden, die vorstehend erwähnt sind, sind Enzyme, die die Amidverknüpfungen in Proteinsubstraten spalten, und die als Proteasen oder synonym als Peptidasen klassifiziert sind siehe Enzymes which are preferably used in such lysis or sample preparation methods mentioned above, are enzymes that cleave the amide linkages in protein substrates and which are classified as proteases, or interchangeably peptidases see.

Eine Protease, die für die Probenpräparation bei der Isolierung von Nucleinsäuren in der bisherigen Technik breit eingesetzt wird, ist Proteinase K aus Tritirachium album siehe z.

A protease which is widely used for the sample preparation for the isolation of nucleic acids in the prior art, is proteinase K from Tritirachium album see, eg. Which is active around neutral pH and belongs to a family of proteases known in the art as subtilisins.

Besonders bevorzugt für die Verwendung bei Lyse- oder Probenpräparationsverfahren, die vorstehend erwähnt sind, ist das Enzym Esperase, eine robuste Protease, die ihre Aktivität sowohl bei hoher Alkalinität als auch bei hohen Temperaturen beibehält Particularly preferred for use in lysis or sample preparation methods mentioned above, the enzyme Esperase, a robust protease which retains its activity in both high alkalinity and at high temperatures EP 1 EP In den auf den Lyseschritt folgenden Probenpräparationsschritten wird die Komponente von Interesse weiter angereichert.

In the lysis step following sample preparation steps, the component of interest is further enriched. Wenn die nicht-proteinartigen Komponenten von Interesse z. If the non-proteinaceous components of interest eg. Nucleinsäuren sind, werden sie normalerweise aus den komplexen Lysegemischen extrahiert, bevor sie in einem Sonden-basierten Test verwendet werden.

Es gibt verschiedene Verfahren der Reinigung von Nucleinsäuren: There are various methods of purification of nucleic acids: Besonders interessant zu Reinigungszwecken ist die Adsorption von Nucleinsäuren an eine Glasoberfläche, obwohl andere Oberflächen möglich sind. Particularly interesting for purification purposes is the adsorption of nucleic acids to a glass surface although other surfaces are possible. Viele Verfahren zur Isolierung von Nucleinsäuren aus ihrer natürlichen Umgebung wurden bereits in den letzten Jahren durch die Verwendung von ihrem Bindungsverhalten an Glasflächen vorgeschlagen.

Many procedures for isolating nucleic acids from their natural environment have been proposed in recent years by the use of their binding behavior to glass surfaces. Wenn unmodifizierte Nucleinsäuren das Ziel sind, ist ein direktes Binden der Nucleinsäuren an ein Material mit einer Silicaoberfläche bevorzugt, da, unter anderen Gründen, die Nucleinsäuren nicht modifiziert werden müssen und sogar native Nucleinsäuren gebunden werden können.

If unmodified nucleic acids are the target, a direct binding of nucleic acids to a material preferably with a silica surface, because, among other reasons, the nucleic acids do not have to be modified and native nucleic acids can even be bound.

Diese Verfahren sind in verschiedenen Dokumenten ausführlich beschrieben. These procedures are described in detail in various documents. In In beispielsweise wird ein Verfahren zum Binden von Nucleinsäuren aus Agarosegelen in Gegenwart von Natriumjodid auf gemahlenes Flintglas vorgeschlagen. For example, a method for binding nucleic acids from agarose gels in the presence of sodium iodide to ground flint glass is proposed.

The method has the selective binding of nucleic acids to glass surfaces in chaotropic salt solutions and separating the nucleic acids from contaminants such as agarose, proteins or cell residue resulted. Zur Abtrennung der Glaspartikel von Verunreinigungen können die Partikel entweder zentrifugiert werden oder es werden Fluide durch die Glasfaserfilter gezogen. To separate the glass particles from contaminants, the particles may be either centrifuged or fluids are drawn through glass fiber filters.

This is a limiting step of the process is used to process large amounts of samples, however, prevented. The use of magnetic particles to immobilize nucleic acids after precipitation by adding salt and ethanol is more convenient and z. Bei diesem Verfahren werden die Nucleinsäuren zusammen mit den Magnetpartikeln agglutiniert. In this process the nucleic acids are agglutinated along with the magnetic particles. The agglutinate is separated from the original solvent by applying a magnetic field and performing a wash step.

Nach einem Waschschritt werden die Nucleinsäuren in einem Tris-Puffer gelöst. After a washing step the nucleic acids are dissolved in a Tris buffer. Dieses Verfahren hat allerdings insofern einen Nachteil, als die Präzipitation für Nucleinsäuren nicht selektiv ist. However, this method has a drawback, as the precipitation of nucleic acids is non-selective. Stattdessen wird ebenso eine Vielzahl von festen und gelösten Substanzen agglutiniert.

Als Ergebnis kann dieses Verfahren nicht zur Entfernung signifikanter Mengen von Inhibitoren für spezifische enzymatische Reaktionen eingesetzt werden, die vorhanden sein können. As a result, this method can not be used to remove significant amounts of inhibitors of specific enzymatic reactions that may be present.

Magnetisches poröses Glas, das Magnetpartikel in einer porösen, bestimmten Glasmatrix enthält und mit einer Schicht, die Streptavidin enthält, bedeckt ist, ist ebenfalls im Handel erhältlich. Magnetic porous glass, which contains magnetic particles in a porous, particular glass matrix and is provided with a layer containing streptavidin is covered, also available commercially.

Dieses Produkt kann zur Isolierung biologischer Materialien verwendet werden, z. This product can be used to isolate biological materials, eg. Proteine oder Nucleinsäuren, wenn sie in einem komplexen Präparationsschritt modifiziert werden, so dass sie kovalent an Biotin binden. For example, proteins or nucleic acids, if they are modified in a complex preparation step so that they bind covalently to biotin.

Magnetisierbare teilchenförmige Adsorbentien, haben sich zur automatischen Probenpräparation als sehr wirksam und geeignet erwiesen. Magnetizable particulate adsorbents have proven for automatic sample preparation to be very effective and suitable. Für diesen Zweck werden fernmagnetische und ferromagnetische sowie superparamagnetische Pigmente verwendet. Far and ferromagnetic as well as superparamagnetic pigments are used for this purpose. The versatility of the process according to the invention can be further improved by adjusting the volume of the respective fluid sample used in the process.

Diese Ausführungsform konzentriert sich auf die Diversität der verschiedenen Typen von Fluidproben und möglicherweise die Typen von Organismen und Nucleinsäuren, die innerhalb von ihnen vorhanden sind.

This embodiment focuses on the diversity of the different types of fluid samples and possibly the types of organisms and nucleic acids that are present within them. ZB können bestimmte Viren in einer Vollblutprobe mehr Ausgangsmaterial als andere Proben erfordern, wenn es bekannt ist, dass im Allgemeinen nur geringe Kopienanzahlen in diesen spezifischen Fällen vorhanden sind.

For example, certain viruses in a whole blood sample require more raw material than other samples when it is known that generally only low copy numbers in these specific cases are available. Somit ist ein bevorzugter Aspekt der Erfindung das vorstehend beschriebene Verfahren, wobei mindestens eine Fluidprobe der Vielzahl von verschiedenen Fluidproben ein verschiedenes Volumen als die anderen Fluidproben aufweist.

Thus, a preferred aspect of the invention is the method described above, wherein at least one fluid sample of the variety of different fluid samples a different volume than the other fluid sample comprising. Es ist ebenfalls bevorzugt, dass, alternativ oder zusätzlich, verschiedene Volumina von Lysepuffer der Vielzahl von verschiedenen Fluidproben zugesetzt werden.

It is also preferred that, alternatively or additionally, various volumes of lysis buffer of the plurality of different fluid samples may be added. Bei einer weiteren bevorzugten Ausführungsform, wenn mindestens eine Fluidprobe der Vielzahl von verschiedenen Fluidproben ein verschiedenes Volumen als die anderen Fluidproben aufweist, wird den Proben Lysepuffer zugesetzt, dass alle Proben nach der Zugabe das gleiche Volumen aufweisen.

In another preferred embodiment, when at least one fluid sample of the variety of different fluid samples a different volume than the other fluid samples which is added to the samples lysis buffer that all samples have the same volume after the addition. In this embodiment, it is even more appropriate to an automated process with different samples simultaneously perform.

Die Vorteile, in der Lage zu sein, ein entsprechendes Ausgangsvolumen in Abhängigkeit von dem Probentyp zu wählen, und davon, dass identische Volumina zur Durchführung der Isolierung und gegebenenfalls z. The advantages of being able to choose an appropriate output volume in dependence on the sample type, and the fact that identical volumes for performing the isolation and optionally z.

For example, the amplification and detection are present, are combined in this approach. The term "solid support" includes any solid materials that were mentioned above in connection with the immobilization of nucleic acids, eg. As magnetic glass particles, glass fibers, glass fiber filter, filter paper, etc.

Ein bevorzugter Aspekt der Erfindung ist das vorstehend beschriebene Verfahren, wobei das feste Trägermaterial Nucleinsäure-bindende Partikel umfasst, vorzugsweise ein oder mehrere der Materialien, ausgewählt aus Silica, Metall, Metalloxiden, Kunststoff, Polymeren und Nucleinsäuren.

A preferred aspect of the invention is the method described above, wherein the solid support material comprises nucleic acid binding particle, preferably one or more of the materials selected from silica, metal, metal oxides, plastics, polymers and nucleic acids.

In einer sehr bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist das feste Trägermaterial magnetische Glaspartikel. In a highly preferred embodiment of the invention, the solid support is magnetic glass particles.

Nucleinsäuren, auf reversible oder irreversible Weise. In particular, means "immobilized on the solid support material" means that the article or articles with the solid support material for the purpose of their separation from surrounding media are associated and z.

As can be obtained by separating the solid support at a later date. In this context, "immobilization" z can. For example, the adsorption of nucleic acids to glass or to other suitable surfaces of solid materials, as described above, include. Further, nucleic acids can be specifically "immobilized" by binding to capture probes, where nucleic acids are bound at substantially complementary nucleic acids which are bound to a solid support by base-pairing.

Im letzteren Fall kann eine solche spezifische Immobilisierung zum überwiegenden Binden von Zielnucleinsäuren führen. In the latter case can result in such specific immobilization for the most binding of target nucleic acids.

In one embodiment, the simultaneous amplification of the at least first and second target nucleic acid is carried out in a vessel. In another embodiment, the simultaneous amplification with at least one nucleic acid in a vessel and at least a second nucleic acid in a second vessel and at the same time the same physical conditions, particularly of temperature and incubation performed.

The "first target nucleic acid" and the "second target nucleic acid" are different nucleic acids. A "fluid sample" means any fluid material that may be a diagnostic test that is directed to nucleic acids subjected, and is preferably derived from a biological source. Auch ist die Fluidprobe bevorzugt von einem Menschen abgeleitet und ist ein Körperfluid.

The fluid sample is preferably derived from a human and is a body fluid. In a preferred embodiment of the invention, the fluid sample of human blood, urine, sputum, perspiration, swab, spinal fluid or pipettable chair. Am stärksten bevorzugt ist die Fluidprobe Menschenblut.

Most preferably, the fluid sample human blood. The term "reaction vessel" includes but is not limited to, tubes or the wells of plates, such as microplate, deep plates or other types of multi-well plates, wherein a reaction for analysis of the fluid sample such. The outer boundaries or walls of such vessels are chemically inert, so that they do not adversely affect the analytical reaction that takes place therein. Vorzugsweise wird die Isolierung der Nucleinsäuren, wie vorstehend beschrieben, ebenfalls in einer Multiwellplatte durchgeführt.

Preferably, the isolation of the nucleic acids, as described above, also carried out in a multiwell plate. In diesem Zusammenhang erlauben Multiwellplatten in analytischen Systemen die parallele Trennung und Analyse oder Lagerung von mehreren Proben.

In this context, multi-well plates in analytical systems allow the parallel separation and analysis, or storage of multiple samples. Multiwellplatten können zur maximalen Flüssigkeitsaufnahme oder zum maximalen Wärmeaustausch optimiert werden. Multiwell plates can be optimized for maximum fluid intake or the maximum heat exchange. Eine bevorzugte Multiwellplatte zur Verwendung in dem Zusammenhang der vorliegenden Erfindung wird zur Inkubation oder Trennung eines Analyten in einem automatisierten Analysator optimiert.

A preferred multi-well plate for use in the context of the present invention is optimized for incubation or separation of an analyte in an automated analyzer. The preferred multi-well plate, which is mentioned in connection with the invention synonym "plate process", comprises: In a preferred embodiment of the multiwell plate lying vessels in a row next to each other joined at the longer side of the almost rectangular shape.

Preferably, the multiwell plate comprises a continuous space which is disposed between adjacent rows of vessels. Der zusammenhängende Raum ist zur Aufnahme einer plattenförmigen magnetischen Vorrichtung konstruiert und angeordnet. The contiguous space is designed to receive a plate-shaped magnetic device and disposed.

In a preferred embodiment, the lower part of the vessel comprises a spherical bottom. In a more preferred embodiment, the lower part of the vessel comprises a conical part which is arranged between the central part and the spherical bottom. In a preferred embodiment, the upper surface includes ribs, the ribs surround the openings of the vessels.

Preferably, a shorter side of the upper part of the vessels a recess, wherein the recess includes a curved surface extending from the rib towards the inside of the vessel. Furthermore, in a preferred embodiment, the vessels include a rounded inner mold. For attachment to the working or incubation station, the base preferably comprises a rim that includes recesses. Schnappbügel an der Station eines Analysators können in die Aussparung eingreifen, um die Platte an einer Station zu befestigen.

Snap bracket to the station of an analyzer can engage in the recess to secure the panel at a station. In a preferred embodiment, the vessels include a substantially constant wall thickness. Die bevorzugte Arbeitsplatte The preferred countertop im Zusammenhang mit der vorliegenden Erfindung ist eine Einkomponentenplatte.

In connection with the present invention is a Einkomponentenplatte. Ansichten einer bevorzugten Arbeitsplatte sind in den Views of a preferred countertop are in the 3 3 bis to 8 8th gezeigt. More preferably, the length is Somit weist die Platte Thus, the plate zwei nebeneinander liegende kürzere Seitenwände Two adjacent shorter side walls und zwei nebeneinander liegende längere Seitenwände And two adjacent longer side walls auf.

Die Arbeitsplatte The worktop umfasst Formarretierelemente Includes Formarretierelemente zur Wechselwirkung mit einem Steuerungsprogramm For interaction with a control program ,. Die Arbeitsplatte The worktop kann gegriffen, befördert und schnell und sicher mit hoher Geschwindigkeit positioniert werden, während die korrekte Orientierung und Position beibehalten werden. Can be gripped, transported and positioned quickly and safely at high speed, while the correct orientation and position to be maintained.

Vorzugsweise sind die Formarretierelemente Preferably, the Formarretierelemente are zum Greifen innerhalb des oberen zentralen Teils angeordnet, vorzugsweise in dem oberen zentralen Drittel der Arbeitsplatte Arranged to grip within the upper central portion, preferably in the upper central third of the countertop Dies hat den Vorteil, dass eine potentielle Verformung der Arbeitsplatte This has the advantage that a potential deformation of the worktop nur eine kleinere Auswirkung auf die Formarretierelemente Only a minor impact on the Formarretierelemente aufweist und dass die Handhabung der Platte And that the handling of the plate robuster ist.

Die Arbeitsplatte The worktop umfasst vorzugsweise die Hardware-Kennzeichen Preferably comprises the hardware identifier und and Die Hardware-Kennzeichen The hardware identifier und and sind für die Arbeitsplatte Are for the worktop einmalig und von den Hardware-Kennzeichen von anderen, in dem System verwendeten Verbrauchsmaterialien verschieden. Different and unique from the hardware characteristics of others, used in the system consumables.

Die Hardware-Kennzeichen The hardware identifier ,. This unique pattern is referred to herein as a unique "surface geometry". Can be loaded into the corresponding stacking position by an analytical instrument in the proper orientation.

An den Seiten der Arbeitsplatte On the sides of the worktop sind Führungselemente Are guide elements und and eigeschlossen Included More 3 3 ,. Sie verhindern das Verkanten der Arbeitsplatte They prevent the tilting of the worktop Die Führungselemente The guide elements ,. Sie sind entlang der längeren Seite They are along the longer side der fast rechteckigen Form durch eine gemeinsame Wand Of the almost rectangular form by a common wall 3 3 getrennt.

Has the advantage that they have in spite of the available space, a large volume, preferably from 4 ml. Ein weiterer Vorteil besteht darin, dass aufgrund der im Wesentlichen konstanten Wanddicke die Herstellung sehr wirtschaftlich ist.

A further advantage is that due to the substantially constant wall thickness, the production is very economical. Are mutually reinforcing and thus a high stability of the shape can be obtained.

Der Raum The space kann Magnete Can magnets ,. Diese Magnete These magnets ,. Are preferably massive devices. Da die Magnete Since the magnets ,. May be solid, high energy density can be achieved. Die kleinen Magnete The small magnets machen es somit leichter, die magnetischen Teilchen Thus making it easier for the magnetic particles während des Eluat-Pipettierens zu sequestrieren.

Dies ermöglicht das Pipettieren des Eluats mit minimalem Verlust durch Reduzieren des Totvolumens des magnetischen Partikelpellets This allows pipetting the eluate with minimal loss by reducing the dead volume of the magnetic particle pellets Weiterhin wird die Gegenwart von magnetischen Teilchen Furthermore, the present is of magnetic particles in dem transferierten Eluat minimiert.

Is minimized in the transferred eluate. Somit wird der Kontakt zwischen der Pipettennadel oder -spitze Thus, the contact between the pipette needle or tip is 3 3 ,. And the liquid contained in the vessel is prevented. Somit ist das Pipettieren von kleinen Volumina von Reagenzien ohne Verlust von Genauigkeit des durchzuführenden Tests möglich. Thus, the pipetting of small volumes of reagents is possible without loss of accuracy of the test to be performed. Die kugelige Boden The spherical base erlaubt eine im Wesentlichen vollständige Verwendung des abgetrennten Eluats und eine Reduktion des Totvolumens, welches das Mitschleppen von Reagenzien oder Proben-Kreuzverunreinigung vermindert.

Allows for substantially complete use of the separated eluate and a reduction of the dead volume, which reduces the entrainment of reagents or sample cross-contamination.

Der Rand auf der Grundfläche The edge on the base der Arbeitsplatte Of the worktop umfasst Aussparungen Includes recesses zum Eingriff mit Schnappbügeln For engaging snap ironing auf der Arbeitsstation On the workstation oder Heizvorrichtung Or heating device oder dem analytischen Instrument Or the analytical instrument 5 5 ,.

Durch das Eingreifen der Schnappbügel Through the intervention of the snap strap in die Aussparungen In the recesses lässt sich die Arbeitsplatte The worktop can be auf der Arbeitsstation On the workstation anordnen und befestigen. Das Vorliegen der Aussparungen The presence of the recesses erlaubt es, dass die Einrastkraft auf die Arbeitsplatte Allows that the engaging force on the countertop fast vertikal zu der Grundfläche Almost vertically to the base wird.

Using TCP requires a separate socket and sliding window on the server for each recipient. UDP broadcast requires a separate copy of the stream for each destination subnet. Both of these methods exhaust the resources of the servers and the network. The server side must transmit and service each of the streams individually, which requires larger and larger server farms. On the network side, the required bandwidth for the application increases in a linear fashion. IP multicast is the only way to scale market data delivery.

To deliver a 1 Mbps stream to recipients, IP multicast would require 1 Mbps. The stream can be delivered by as few as two serversone primary and one backup for redundancy. There are two main phases of market data delivery to the end user. In the first phase, the data stream must be brought from the exchange into the brokerages network. Typically the feeds are terminated in a data center on the customer premise.

The feeds are then processed by a feed handler, which may normalize the data stream into a common format and then republish into the application messaging servers in the data center.

The second phase involves injecting the data stream into the application messaging bus which feeds the core infrastructure of the trading applications. The large brokerage houses have thousands of applications that use the market data streams for various purposes, such as live trades, long term trending, arbitrage, etc.

Many of these applications listen to the feeds and then republish their own analytical and derivative information. For example, a brokerage may compare the prices of CSCO to the option prices of CSCO on another exchange and then publish ratings which a different application may monitor to determine how much they are out of synchronization.

Figure 16 Market Data Distribution Players The delivery of these data streams is typically over a reliable multicast transport protocol, traditionally Tibco Rendezvous. Tibco RV operates in a publish and subscribe environment. Each financial instrument is given a subject name, such as CSCO. Each application server can request the individual instruments of interest by their subject name and receive just a that subset of the information.

This is called subject-based forwarding or filtering. Subject-based filtering is patented by Tibco. A distinction should be made between the first and second phases of market data delivery.

The delivery of market data from the exchange to the brokerage is mostly a one-to-many application. The only exception to the unidirectional nature of market data may be retransmission requests, which are usually sent using unicast. The trading applications, however, are definitely many-to-many applications and may interact with the exchanges to place orders.

Figure 17 Market Data Architecture Design Issues Number of GroupsChannels to Use Many application developers consider using thousand of multicast groups to give them the ability to divide up products or instruments into small buckets. Normally these applications send many small messages as part of their information bus.

Usually several messages are sent in each packet that are received by many users. Sending fewer messages in each packet increases the overhead necessary for each message. In the extreme case, sending only one message in each packet quickly reaches the point of diminishing returnsthere is more overhead sent than actual data.

Application developers must find a reasonable compromise between the number of groups and breaking up their products into logical buckets. The instruments are broken up alphabetically: This approach allows for straight forward networkapplication management, but does not necessarily allow for optimized bandwidth utilization for most users.

Understanding the way users pull down the data and then organize it into appropriate logical groups optimizes the bandwidth for each user. In many market data applications, optimizing the data organization would be of limited value.

Typically customers bring in all data into a few machines and filter the instruments. Using more groups is just more overhead for the stack and does not help the customers conserve bandwidth. Another approach might be to keep the groups down to a minimum level and use UDP port numbers to further differentiate if necessary. The other extreme would be to use just one multicast group for the entire application and then have the end user filter the data.

In some situations this may be sufficient. Intermittent Sources A common issue with market data applications are servers that send data to a multicast group and then go silent for more than 3. These intermittent sources may cause trashing of state on the network and can introduce packet loss during the window of time when soft state and then hardware shorts are being created.

Both of these optimizations of the PIM protocol do not have any data-driven events in creating forwarding state. That means that as long as the receivers are subscribed to the streams, the network has the forwarding state created in the hardware switching path. Null Packets In PIM-SM environments a common method to make sure forwarding state is created is to send a burst of null packets to the multicast group before the actual data stream.

The application must efficiently ignore these null data packets to ensure it does not affect performance. The sources must only send the burst of packets if they have been silent for more than 3 minutes. A good practice is to send the burst if the source is silent for more than a minute. Many financials send out an initial burst of traffic in the morning and then all well-behaved sources do not have problems.

Periodic Keepalives or Heartbeats An alternative approach for PIM-SM environments is for sources to send periodic heartbeat messages to the multicast groups. This is a similar approach to the null packets, but the packets can be sent on a regular timer so that the forwarding state never expires. There is now a CLI knob to allow the state for a S, G to stay alive for hours without any traffic being sent.

The S, G expiry timer is configurable. Unnecessary use of the feedback option can create excessive multicast state in the network. If the RTCP traffic is not required by the application it should be avoided. Fast Producers and Slow Consumers Today many servers providing market data are attached at Gigabit speeds, while the receivers are attached at different speeds, usually Mbps. This creates the potential for receivers to drop packets and request re-transmissions, which creates more traffic that the slowest consumers cannot handle, continuing the vicious circle.

The solution needs to be some type of access control in the application that limits the amount of data that one host can request. QoS and other network functions can mitigate the problem, but ultimately the subscriptions need to be managed in the application. However, there are some brokerage houses that are still using very old versions of TibcoRV that use UDP broadcast support for the resiliency.

This limitation is often cited as a reason to maintain a Layer 2 infrastructure between TICs located in different data centers. These older versions of TibcoRV should be phased out in favor of the IP multicast supported versions.

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